SIM做的很嚴(yán)謹(jǐn)，還互換了熒光標(biāo)記又做了一遍

DMC1、RAD51看的差不多了，開始看RPA，在DSB初期RPA結(jié)合到DNA斷開處露出的單鏈DNA上，而后會(huì)被DMC1、RAD51取代（這兩個(gè)家伙介導(dǎo)單鏈DNA入侵同源雙鏈），進(jìn)一步審視ChIP－seq數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)RPA覆蓋的區(qū)域恰好是DMC1和RAD51的總和 – 和已經(jīng)報(bào)道的結(jié)果一致

RPA會(huì)被DMC1、RAD51取代，這沒問題（以往的報(bào)道、作者的結(jié)果都說明了這一點(diǎn)），但被取代后RPA是否還會(huì)在DNA上待著并不清楚，作者比較了雄性小鼠常染色體及性染色體中的X染色體（Y比X短一截，因此X染色體有一部分可以說缺乏可以配對(duì)的同源染色體），可見，在X染色體上DMC1、RAD51隨損傷增加密度都增加，且增速高于常染色體，但RPA增速卻低于常染色體，暗示修復(fù)模板上存在RPA，X染色體因?yàn)橛幸徊糠秩狈ε鋵?duì)的修復(fù)模板，造成RPA密度低了下來（前面的數(shù)據(jù)也看到了修復(fù)模板鏈上存在RPA）

作者從ChIP－seq數(shù)據(jù)中還發(fā)現(xiàn)RPA、DMC1、RAD51在損傷的DNA兩條單鏈上分布并不等量

RPA會(huì)結(jié)合損傷模板，看損傷鏈DMC1、RAD51和修復(fù)模板鏈RPA的關(guān)系，發(fā)現(xiàn)DMC1峰對(duì)應(yīng)RPA峰，都在損傷位點(diǎn)附近，而RAD51分布在離損傷位點(diǎn)較遠(yuǎn)的地方，且對(duì)應(yīng)的模板鏈上幾乎沒用RPA分布

最后來個(gè)模式圖：DMC1結(jié)合在靠近損傷的位置，RAD51挨著DMC1，兩者一起介導(dǎo)損傷鏈入侵同源模板鏈，同源模板鏈處有RPA結(jié)合穩(wěn)定同源介導(dǎo)修復(fù)中間體

挺好玩的一篇文章，把具備堿基分辨率的ChIP－seq技術(shù)和SIM超分辨技術(shù)一起使用，追蹤一個(gè)經(jīng)典的細(xì)胞行為 － DNA損傷修復(fù)，復(fù)現(xiàn)前人結(jié)論，呈現(xiàn)一下觀察到的現(xiàn)象……

Anjali Gupta Hinch， Philipp W． Becker， Tao Li， et al． The Configuration of RPA， RAD51， andDMC1Binding in Meiosis Reveals the Nature of Critical Recombination Intermediates ［J］． Molecular Cell ， August 20， 2020．

此次文章交流會(huì)

主題：CNS前沿文獻(xiàn)追蹤 – 病毒衣殼在細(xì)菌內(nèi)部的運(yùn)動(dòng)模式

時(shí)間：9月17日 周四 19：00 － 20：00

主講人：于博士

參考文獻(xiàn)：

Kate McArthur， Lachlan W． Whitehead， JohnM． Heddleston， Lucy Li， et al． BAK／BAX macropores facilitate mitochondrialherniation and mtDNA efflux during apoptosis．［J］． Science， 23 February 2018．