許多做出了偉大發(fā)現(xiàn)的科學(xué)家在回憶當(dāng)年的情況時(shí),都會(huì)說(shuō):“我偶然發(fā)現(xiàn)……”也許是一個(gè)反常的現(xiàn)象,也許是一串異常的數(shù)據(jù),又或者是一種從沒(méi)見(jiàn)過(guò)的奇怪事物。接著,根據(jù)教科書(shū)或史書(shū)上的記載,他們就順理成章地做出了偉大發(fā)現(xiàn),仿佛真理只是散落在草叢里閃閃發(fā)亮的寶石,運(yùn)氣好的話(huà)彎腰撿起就能發(fā)大財(cái)。

當(dāng)然,事實(shí)并非如此。實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)的各類(lèi)異常,很容易被當(dāng)作雜音忽略,當(dāng)作錯(cuò)誤篩除,當(dāng)作極端值排除。需要勇氣和眼光,才敢去、才能去冒險(xiǎn)挖掘異常背后的故事。這場(chǎng)探險(xiǎn)的旅程中,科學(xué)家是如何掌握線(xiàn)索、如果順藤摸瓜,如何檢索到數(shù)量稀少但卻至關(guān)重要的文獻(xiàn)的?他們?cè)鯓尤�盤(pán)思考,怎樣尋找研究的切入點(diǎn),怎樣搞清自己走到了哪一步?今天的文章講述了清華大學(xué)俞立老師發(fā)現(xiàn)和研究遷移體的歷程,希望帶給大家一些啟發(fā)。

撰文 | 俞立(膜生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室)

我現(xiàn)在還記得,那是2012年的一天。當(dāng)時(shí),我正在檢查前一天透射電子顯微鏡拍出的圖像。有個(gè)不尋常的東西吸引了我的眼球。那是一個(gè)位于細(xì)胞之外的囊泡,其中充滿(mǎn)了很多更小的囊泡,看起來(lái)像一只開(kāi)口的石榴。回想起來(lái),我以前見(jiàn)過(guò)類(lèi)似的結(jié)構(gòu),但這張圖像的獨(dú)特之處在于,多個(gè)囊泡集中地位于胞外,有些內(nèi)部是空的,有些有少數(shù)小囊泡,還有些充滿(mǎn)了小囊泡。這張電鏡圖促使我開(kāi)始思考這些結(jié)構(gòu)到底是什么。是死細(xì)胞的碎片?過(guò)于整潔了。是外泌體?體積太大了。是脫落小泡嗎?這倒是有可能,但囊泡內(nèi)部又有什么呢?很快,大家就把這種囊泡戲稱(chēng)為石榴體(pomegranate-like structure,PLS),以這幅電鏡圖像為起點(diǎn),我們開(kāi)始了對(duì)石榴體的研究之旅。

為了鑒定出石榴體的標(biāo)記蛋白,我們首先使用亞細(xì)胞分離法分離得到石榴體,再利用質(zhì)譜技術(shù)與綠色熒光蛋白(GFP)標(biāo)記的方法,很快鑒定出石榴體上富集的多種蛋白。其中,四跨膜蛋白4(Tetraspanin4,Tspan4)大量富集于PLS,能夠作為一個(gè)很好的標(biāo)記蛋白。但真正令我們吃驚的是,Tspan4同時(shí)會(huì)標(biāo)記出與一個(gè)同細(xì)胞尾端相連的膜管網(wǎng)絡(luò),而石榴體就位于這些膜管的分叉點(diǎn)或末端。它整體的外觀(guān)就像一個(gè)集成電路(圖1)�？焖贆z索文獻(xiàn)后,我們發(fā)現(xiàn)這些膜管是收縮絲(retraction fibers),首次發(fā)現(xiàn)于1963年(Taylor and Robbins, 1963)。不過(guò),目前尚未有文獻(xiàn)報(bào)道過(guò)PLS結(jié)構(gòu)。利用綠色熒光蛋白標(biāo)記的Tspan4,我們實(shí)時(shí)拍攝了石榴體的形成過(guò)程,并很快發(fā)現(xiàn)它與細(xì)胞遷移相關(guān)。當(dāng)細(xì)胞遷移時(shí),收縮絲被拉出,石榴體開(kāi)始在收縮絲的末端或交接處生長(zhǎng)。隨著細(xì)胞的不斷遷移,收縮絲斷裂,石榴體從細(xì)胞上脫離。鑒于石榴體的形成依賴(lài)于細(xì)胞遷移,我們把石榴體正式命名為遷移體(migrasome)(Ma et al．, 2015)。

圖1:L929細(xì)胞(譯注:一種小鼠成纖維細(xì)胞)中的遷移體。比例尺,20微米。

在發(fā)現(xiàn)遷移體后,最重要的問(wèn)題是遷移體有什么功能。在當(dāng)時(shí)的研究階段,我們無(wú)法真正回答這個(gè)問(wèn)題,我們甚至不確定遷移體是否存在于活體內(nèi)。因此我們暫時(shí)繞開(kāi)這一問(wèn)題,轉(zhuǎn)而研究遷移體能做什么。它們是用來(lái)釋放細(xì)胞質(zhì)蛋白等細(xì)胞內(nèi)容物的嗎?的確,我們發(fā)現(xiàn)mCherry(譯注:一種紅色熒光蛋白)可以轉(zhuǎn)運(yùn)到遷移體中,隨后通過(guò)遷移體從細(xì)胞中釋放出去。我們把這一過(guò)程命名為遷移性胞吐(migracytosis)。遷移體可以介導(dǎo)細(xì)胞間通訊嗎?我們發(fā)現(xiàn)一個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生的遷移體可以被另一個(gè)細(xì)胞吞噬,這表明遷移體至少可能參與胞內(nèi)物質(zhì)在細(xì)胞之間的傳遞,因而可能介導(dǎo)細(xì)胞間通訊。雖然這些概念驗(yàn)證性的實(shí)驗(yàn)還不能告訴我們遷移體的功能究竟是什么,但這些結(jié)果讓我們提出了一系列假說(shuō),以引導(dǎo)下一階段的研究工作。

這些假說(shuō)是:

1)遷移體產(chǎn)生于免疫細(xì)胞、轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞以及正在發(fā)育階段中的細(xì)胞等遷移細(xì)胞中。2)遷移體由確定的遺傳通路調(diào)控;3)遷移體可以介導(dǎo)細(xì)胞間的通訊。

在過(guò)去幾年中,我們?yōu)槔斫膺w移體所做的探索性工作主要由以上假說(shuō)引導(dǎo),其中一些假說(shuō)目前已經(jīng)得到證實(shí)。

除了假說(shuō)之外,我們同樣需要一個(gè)研究策略。為了回答遷移體究竟具有什么功能(這可能是最重要的問(wèn)題),我們需要建立一個(gè)研究遷移體的體內(nèi)模型。有了這個(gè)模型,我們就可以制備遷移體缺陷型動(dòng)物,找到這些動(dòng)物身上出現(xiàn)的問(wèn)題,從而理解遷移體的生理功能。當(dāng)然,在此之前,我們首先要知道哪些基因是形成遷移體所必需的。因此,我們將研究聚焦在研究遷移體的遺傳通路和構(gòu)建遷移體的體內(nèi)模型上。在這兩個(gè)目標(biāo)之外,我們還需要開(kāi)發(fā)研究遷移體的工具,特別是檢測(cè)遷移體的方法和探針。

我們現(xiàn)在只需要使用GFP標(biāo)記的遷移體標(biāo)志物,例如PH-GFP,就可以輕松地在顯微鏡下檢測(cè)到遷移體。此外,我們發(fā)現(xiàn)小麥精子蛋白WGA可以很好地將遷移體染色;基于這一發(fā)現(xiàn),我們開(kāi)發(fā)了一項(xiàng)使用WGA來(lái)檢測(cè)遷移體的非常方便的方法。

遷移體形成時(shí),伸縮絲從遷移細(xì)胞的軌跡邊緣被拽出,這意味著伸縮絲必須粘附在細(xì)胞外基質(zhì)上。由于整合素(integrin)是粘附于細(xì)胞外基質(zhì)的主要分子,同時(shí)我們的質(zhì)譜分析結(jié)果也顯示遷移體上富集著整合素,因此我們將目光聚焦在整合素上。研究顯示,具有活性的整合素在遷移體形成前就已經(jīng)集合在了收縮絲的端中,活性整合素復(fù)合物和細(xì)胞外基質(zhì)互相作用,沿著收縮絲搭建了多個(gè)粘附位點(diǎn),這些位點(diǎn)隨后成為遷移體形成的位點(diǎn)(Wu et al．, 2017)。

目前,遷移體機(jī)制的研究進(jìn)展大都起源于我們對(duì)遷移體形成過(guò)程的細(xì)胞生物學(xué)研究。鑒定出Tspan4是遷移體標(biāo)志物后不久,我們還注意到,Tspan4似乎可以促進(jìn)遷移體形成。Tspan4屬于四跨膜蛋白家族,該家族有33個(gè)成員蛋白。我們發(fā)現(xiàn),其中14個(gè)成員蛋白在過(guò)量表達(dá)的情況下都可以促進(jìn)遷移體形成(Huang et al．, 2019)。所有的四跨膜蛋白都有4個(gè)跨膜結(jié)構(gòu)域,這些蛋白可以形成所謂的四跨膜蛋白富集的微結(jié)構(gòu)域(TEM)(Rubinstein, 2011)。TEM尺寸大約為100納米,富含一系列蛋白和脂閥類(lèi)脂質(zhì),如膽固醇等。我們發(fā)現(xiàn),在遷移體形成過(guò)程中,很多小的TEM會(huì)聚集形成微米級(jí)別的宏結(jié)構(gòu)域,我們稱(chēng)之為四跨膜蛋白富集的宏結(jié)構(gòu)域(TEMAs)。有意思的是,我們發(fā)現(xiàn)TEMA的形成與遷移體在收縮絲上的生長(zhǎng)有關(guān)。這提示我們,TEMA的形成可能促使了收縮絲發(fā)生膜形變而形成遷移體。但是,我們?cè)趺床拍茯?yàn)證這個(gè)想法呢?

實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵進(jìn)展源于一個(gè)意外的發(fā)現(xiàn)。在項(xiàng)目初期,我們計(jì)劃使用體外系統(tǒng)來(lái)研究Tspan4在膜上的行為。因此,我們需要將Tspan4-GFP導(dǎo)入巨型單層脂質(zhì)體(Giant Unilamellar Vesicle, GUV)中,觀(guān)察Tspan4-GFP在膜上的行為。于是,我們首先把Tspan4整合到了蛋白脂質(zhì)體中,隨后通過(guò)電擊融合蛋白脂質(zhì)體來(lái)制備GUV。結(jié)果令人大吃一驚——在Tspan4-GFP蛋白脂質(zhì)體電擊融合的過(guò)程中,我們觀(guān)察到了一些串珠狀的結(jié)構(gòu),與遷移體及收縮絲的結(jié)構(gòu)驚人的相似;而在對(duì)照組的蛋白脂質(zhì)體的融合過(guò)程中卻沒(méi)有出現(xiàn)這樣的結(jié)構(gòu)。這個(gè)發(fā)現(xiàn)提示,Tspan4可能自己就足以驅(qū)動(dòng)遷移體的形成。然而,由于我們并不清楚電擊融合過(guò)程中究竟發(fā)生了什么,因此我們決定設(shè)計(jì)一個(gè)體外系統(tǒng),來(lái)模擬遷移體的形成過(guò)程。

指導(dǎo)我們?cè)O(shè)計(jì)體外系統(tǒng)的關(guān)鍵靈感是我們意識(shí)到遷移細(xì)胞產(chǎn)生的拉力是遷移體產(chǎn)生的關(guān)鍵因素。因此,我們?cè)O(shè)計(jì)了兩套不同的方案來(lái)將GUV拉成為膜管,以模擬收縮絲形成的過(guò)程。在第一套方案中,我們把GUV粘在流體小室中,然后使用液流推動(dòng)GUV從而制造拉力。在第二套方案中,我們使用玻璃針頭手動(dòng)從GUV拉出膜管。這兩套方案都讓我們成功地從鑲嵌了Tspan4-GFP的GUV中拉出膜管,在拉管過(guò)程中,TEM聚集形成TEMA,并在膜管上自發(fā)膨脹形成類(lèi)似于遷移體的結(jié)構(gòu)。

但是,為何TEMA的聚集會(huì)導(dǎo)致膜管膨脹成遷移體呢?科研中最讓人難受的事莫過(guò)于做了一個(gè)完美的實(shí)驗(yàn)卻無(wú)法解釋其結(jié)果。萬(wàn)幸的是,我與以色列特拉維夫大學(xué)(Tel Aviv University)的邁克爾·科茲洛夫(Michael Kozlov)教授相識(shí)多年,他是個(gè)物理學(xué)出身的生物物理學(xué)家,是膜塑形領(lǐng)域的頂尖專(zhuān)家。邁克爾教授和他實(shí)驗(yàn)室一位聰明的研究生本·祖克(Ben Zuker)很快為收縮絲到遷移體的膜形變過(guò)程建立一個(gè)數(shù)學(xué)模型。該模型表明,當(dāng)組合出的Tspan4富集的宏結(jié)構(gòu)域的彎曲剛性超過(guò)膜的其余部位,收縮絲會(huì)自發(fā)地膨脹形成遷移體。這個(gè)模型可以用下面的類(lèi)比來(lái)理解:假設(shè)我們有一個(gè)直徑恒定的橡皮筋,但是不同部位的彈性不一樣,當(dāng)我們拉伸橡皮筋時(shí),拉力會(huì)把橡皮筋拉長(zhǎng)并拉細(xì),硬的部位相比柔軟的部位拉伸得少,因此會(huì)更粗。這個(gè)模型預(yù)測(cè),TEMA的硬度會(huì)是收縮絲其余部位的5-10倍大, 在后續(xù)工作中, 原子力顯微鏡直接測(cè)量了遷移體膜的硬度,證實(shí)了這一預(yù)測(cè)。因此,遷移體的形成是由簡(jiǎn)單的物理過(guò)程所驅(qū)動(dòng)的。

這一模型為我們提供了一個(gè)理解遷移體形成的理論框架。更重要的是,它確定了四跨膜蛋白在遷移體形成過(guò)程中的中心地位,此基礎(chǔ)上,我們得以在研究遷移體的生理功能。

在研究遷移體和遷移性胞吐的生理功能時(shí),最重要且最困難的部分是建立合適的動(dòng)物模型。當(dāng)時(shí)我們并不知道遷移體會(huì)在什么時(shí)間、什么部位、在哪種動(dòng)物里出現(xiàn)。為了讓搜索更加高效,我們制定了幾條衡量好模型的標(biāo)準(zhǔn)。首先,模型必須便于顯微鏡觀(guān)察。其次,模型需要容易開(kāi)展遺傳操作。最后,我們想要的模型應(yīng)該是很容易獲得的——如果隔壁實(shí)驗(yàn)室就有,那就再好不過(guò)了。最后,我們決定嘗試斑馬魚(yú)胚胎。斑馬魚(yú)胚胎是透明的,因此是顯微鏡下研究的絕佳之選;而且基因敲除魚(yú)很容易得到;最重要的是,使用斑馬魚(yú)為模型的著名發(fā)育生物學(xué)家孟安明教授就在我們隔壁樓里。

我們首先構(gòu)建了表達(dá)遷移體標(biāo)記蛋白的斑馬魚(yú)胚胎,并用活細(xì)胞成像技術(shù)觀(guān)察這些胚胎。第一次試驗(yàn)中,我們就在活體胚胎里觀(guān)測(cè)到了大量的遷移體和收縮絲(Jiang et al．, 2019)。我們發(fā)現(xiàn)遷移體主要形成于原腸運(yùn)動(dòng)期。我們已經(jīng)知道了遷移體形成所必需的一系列基因,如itgb1b, tspan4a 和tspan7,因此我們制備了敲除上述三個(gè)基因的斑馬魚(yú)。我們發(fā)現(xiàn),遷移體的數(shù)量在敲除魚(yú)的胚胎中有所減少,更有趣的是,這些遷移體減少的斑馬魚(yú)都出現(xiàn)了器官形成的缺陷——最明顯的表型是不對(duì)稱(chēng)發(fā)育缺陷,包括左右翻轉(zhuǎn),多種器官的雙側(cè)復(fù)制(譯注:即本該只在一側(cè)出現(xiàn)的器官長(zhǎng)在了身體另一側(cè)或雙側(cè)都有)。

但這是否意味著敲除斑馬魚(yú)中的器官生成缺陷,是遷移體形成減少所致的呢?

答案是:并不一定。因?yàn)檫@些基因還具有與遷移體無(wú)關(guān)的其他功能,也可能是那些功能調(diào)控了器官生成。這樣說(shuō)來(lái),遷移體形成也完全可能與器官生成毫不相關(guān)。實(shí)際上,在很多領(lǐng)域里,當(dāng)我們?nèi)パ芯磕硞�(gè)特定的細(xì)胞內(nèi)事件的生理功能時(shí),都會(huì)遇到類(lèi)似的問(wèn)題,至今也沒(méi)有解決的辦法。好在我們可以純化遷移體,開(kāi)展回補(bǔ)實(shí)驗(yàn)(rescue)——從野生型斑馬魚(yú)胚胎里純化出遷移體,隨后注射到敲除魚(yú)的胚胎中�；匮a(bǔ)實(shí)驗(yàn)顯示,敲除魚(yú)的胚胎在注射了遷移體后,成功地恢復(fù)了器官形成,這表明器官形成的確依賴(lài)于遷移體,而不是Tspan4和Tspan7基因中那些與遷移體無(wú)關(guān)的其他功能。

下一個(gè)問(wèn)題,遷移體又是如何調(diào)控器官生成的呢?我們推斷遷移體可能包含某些信號(hào)分子,這些分子會(huì)在器官生成過(guò)程中指導(dǎo)細(xì)胞做出正確響應(yīng)。為了檢測(cè)這個(gè)理論,我們使用定量質(zhì)譜的方法分析了純化的遷移體。我們發(fā)現(xiàn),遷移體中的確富集了一批配體分子,如趨化因子、細(xì)胞因子、形態(tài)發(fā)生素、生長(zhǎng)因子等。其中,我們特別注意到了趨化因子CXCL12,因?yàn)镃XCL12a的敲除魚(yú)出現(xiàn)了和遷移體缺陷魚(yú)相似的不對(duì)稱(chēng)發(fā)育缺陷。此外,將野生斑馬魚(yú)胚胎中的遷移體注射入CXCL12a敲除的斑馬魚(yú)胚胎中,能夠成功恢復(fù)不對(duì)稱(chēng)發(fā)育的缺陷。因此,我們認(rèn)為CXCL12是遷移體調(diào)控不對(duì)稱(chēng)發(fā)育中的關(guān)鍵分子。

在斑馬魚(yú)胚胎中,有一種帶纖毛的器官叫庫(kù)氏泡(Kupffer’s vesicle,KV),它能導(dǎo)致其他器官的左右不對(duì)稱(chēng)發(fā)育。我們發(fā)現(xiàn),遷移體對(duì)KV的形成是必需的:在遷移體缺陷的胚胎中,KV不能有效形成。KV由一組遷移性前體細(xì)胞發(fā)育而來(lái),這組細(xì)胞被稱(chēng)為背部先驅(qū)細(xì)胞(dorsal forerunner cells, DFCs)。在遷移體缺陷胚胎中,DFCs在遷移過(guò)程中跑散了,無(wú)法到達(dá)它們的目的地。這提示了一種可能性,即,遷移體作為區(qū)域性的趨化信號(hào),指引遷移型DFC到達(dá)胚胎正確位置。為驗(yàn)證這一假說(shuō),我們從野生型胚胎中純化得到遷移體,把它們嵌入瓊脂糖珠上,隨后將這些珠子插入胚胎的腹部一側(cè)(正常情況下DFCs不會(huì)在腹部出現(xiàn))。我們發(fā)現(xiàn),含有遷移體的珠子可以吸引DFCs到達(dá)腹部。因此確認(rèn),遷移體是DFCs的趨化信號(hào)。

現(xiàn)在,拼圖還剩最后一塊沒(méi)有完成。如果遷移體是DFCs的趨化信號(hào),它們一定需要在DFCs遷移路徑的終點(diǎn)區(qū)域富集。目前的研究已證實(shí)DFCs會(huì)在胚盾(譯注:即embryonic shield,脊椎動(dòng)物胚胎發(fā)育初期出現(xiàn)的不透明盾牌樣結(jié)構(gòu))富集;因此我們檢查了胚盾周?chē)�的區(qū)域。讓我們意外的是,我們?cè)谂叨芟路桨l(fā)現(xiàn)了一個(gè)大空腔,并稱(chēng)之為“胚盾腔”(embryonic shield cavity)。遷移體在這個(gè)腔體內(nèi)高度富集;當(dāng)我們向斑馬魚(yú)胚胎注射純化的遷移體時(shí),它們最終會(huì)停留在胚盾腔里。這也可以解釋我們的補(bǔ)救實(shí)驗(yàn)為何能夠成功。

以上這些工作確立了遷移體首個(gè)已知的生理功能,更重要的是,它提供了一個(gè)范例,可用來(lái)研究遷移體如何在其他生命過(guò)程中起作用。在這個(gè)范例中,信號(hào)分子被打包裝入遷移體中,隨后由遷移體在指定地點(diǎn)釋放,從而激活周?chē)�的�?xì)胞。從這個(gè)意義上來(lái)說(shuō),遷移體可以整合空間、時(shí)間和特定化學(xué)信息,這些信息對(duì)協(xié)調(diào)胚胎發(fā)育等復(fù)雜生命過(guò)程中的細(xì)胞群體行為不可或缺。簡(jiǎn)而言之,遷移體就是帶寄送地址的信息包裹。

圖2:遷移體的功能。

待解謎題The Known Unknowns

從我們的研究延伸開(kāi)去,還存著很多明顯的問(wèn)題有待回答。此處總結(jié)如下,并分享一些我的想法。

1)遷移體的生物發(fā)生機(jī)制究竟是什么?

當(dāng)前,除了我們鑒定到的少數(shù)分子,控制遷移體形成的信號(hào)通路仍不為人知。甚至,我們對(duì)遷移體的眾多基本特點(diǎn)仍不夠理解。例如,遷移體內(nèi)部的囊泡是什么?這些囊泡是如何進(jìn)入遷移體的?它們有何功能?

2)遷移體水平傳遞是否有生理功能?

我們知道遷移體能夠被周?chē)��?xì)胞吞掉,這可能是細(xì)胞之間物質(zhì)傳遞的一種機(jī)制。最近,我們發(fā)現(xiàn)遷移體中會(huì)選擇性地富集一些種類(lèi)的mRNA,當(dāng)遷移體被周?chē)��?xì)胞吞掉后,遷移體中的mRNA會(huì)在吞掉遷移體的細(xì)胞中翻譯成蛋白,并改變?cè)摷?xì)胞的行為 (Zhu et al, Cell Research, accepted)。當(dāng)前,我們還不清楚遷移體除mRNA和蛋白外還可以傳遞哪些物質(zhì),也不清楚這種細(xì)胞間物質(zhì)傳遞是否在體內(nèi)發(fā)生并具有生理功能。

3)除了胚胎發(fā)育,遷移體還在哪些生物過(guò)程中起到重要作用?

很多免疫細(xì)胞在發(fā)育和免疫應(yīng)答過(guò)程中會(huì)發(fā)生遷移,并分泌大量信號(hào)分子。這聽(tīng)上去就像是遷移體可以大展身手的場(chǎng)景。

4)遷移體有細(xì)胞自主性的功能嗎?

細(xì)胞可否使用遷移體來(lái)吐出不想保留的物質(zhì)?這樣可以維持自身穩(wěn)態(tài)、丟棄受損或有害的細(xì)胞成分、維持表面分子數(shù)目的最優(yōu)水平……

5)遷移體的進(jìn)化起源是什么?

它們來(lái)源于進(jìn)化早期的單細(xì)胞生物,還是在多細(xì)胞生物出現(xiàn)后才出現(xiàn)?使用動(dòng)物界內(nèi)早期分支的模式生物系統(tǒng),或許能夠幫助我們回答這個(gè)有意思的問(wèn)題。

科學(xué)史提醒我們,在我們能想到的待解之謎外,總有“未知的”未知——憑我們現(xiàn)有的知識(shí),根本無(wú)法預(yù)料將來(lái)還會(huì)遇到哪些問(wèn)題。面對(duì)這些未知的未知,我們必須承認(rèn),大自然總是比我們想的更復(fù)雜。我們要有一顆敢于不斷挑戰(zhàn)已有模式的心,也需要有一雙銳利的眼睛,能挑出現(xiàn)有理論框架下無(wú)法解釋的現(xiàn)象。懷著這樣的心態(tài),或許再加上點(diǎn)好運(yùn),我們終將開(kāi)啟滿(mǎn)是未知卻新奇的世界。

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