藻類植物介紹與藻類光生物反應器設計
我們看到的從很遠星系來的光是在幾百萬年之前發(fā)出的,在我們看到的最遠的物體的情況下,光是在80億年前發(fā)出的。這樣當我們看宇宙時,我們是在看它的過去。
——霍金《時間簡史》
(1)藻類植物介紹 Algae(alga)
一、藻類植物概述
(一) 藻類植物的特征
1. 具有光合作用色素
2. 生殖器官多為單細胞,無保護層保護
3. 無根、莖、葉的分化
4. 無胚的形成
(二) 藻類植物的分類
1. 根據(jù)光合色素的種類
2. 貯藏養(yǎng)分的種類
3. 細胞壁的成分
4. 鞭毛有無及著生的位置和類型
5. 有性生殖的方式:同配生殖;異配生殖;卵式生殖
6. 生活史
7. 根據(jù)上述特征,把藻類分成9門:藍藻門、裸藻門、甲藻門、金藻門、黃藻門、硅藻門、綠藻門、紅藻門、褐藻門
此外:藻類的分門分綱,不同的學者有不同的觀點。
隱藻門(甲藻門 隱藻綱Cryptophyceae 隱鞭藻目)
輪藻門(綠藻門 輪藻綱Characeae 輪藻目Charales 輪藻屬Chara——復雜原植體)
原綠藻門
植物體具葉綠素,?
1. 僅有葉綠素a(葉綠素c在某些黃藻門的種中存在)?
2. 原核生物——藍藻門Cyanophyta
2.真核生物?
3.具有水溶性的藍色素和紅色素——紅藻門Rhodophyta?
3.具有質體色素葉黃素(葉綠素c存在于某些種)——黃藻門Xanthophyta?
1.具有葉綠素a和c?
4.具有纖維素細胞壁的大型海藻——褐藻門Phaeophyta?
4.具有纖維素細胞壁的小型、多為單細胞的藻類,前端具有2條不等鞭毛——
金藻門Chrysophyta
4.具有硅質的細胞壁的小型、多為單細胞的藻類——硅藻門Bacillariphyta
4.缺乏細胞壁或有纖維素板的細胞壁;具側生的2條不等鞭毛——
甲藻門Pyrrohophyta
1.具葉綠素a和b?
5.缺乏細胞壁的單細胞藻類——裸藻門Euglenophyta
5.有細胞壁,有復雜分化的藻類——綠藻門Chlorophyta
分 類
藻類在植物界屬于低等植物。藻類學家一般將藻類共分11個門,其順序如下:
1.藍藻門Cyanophyta 下設1綱,藍藻綱Cyanophyceae。
2.金藻門Chrysophyta 常設1綱,金藻綱Chrysophyceae。
3.黃藻門Xanthophyta 分為2個綱,黃藻綱Xanthophyceae和綠胞藻綱Chloromonadaphyceae。
4.硅藻門Bacillariophyta 根據(jù)殼的形狀和花紋排列方式,硅藻門分成2個綱。中心硅藻綱Centriae和羽紋硅藻綱Pennatae。
5.甲藻門Pyrrophyta 僅1綱,甲藻綱Pyrrophyceae。
6.隱藻門Cryptophyta 僅1綱,隱藻綱Cryptophyceae。
7.裸藻門Euglenophyta 僅1綱,裸藻綱Euglenopbyceae。
8.綠藻門Chlorophyta 分為2個綱,即綠藻綱Chlorophyceae和接合藻綱Conjugatophyceae。
9.輪藻門Charophyta 1目,輪藻目:麗藻屬、輪藻屬
10.褐藻門Fhaeophyta ——海帶
11.紅藻門Rhodophyta ——紫菜屬
浮游藻類一般多見于前八個門,輪藻、褐藻和紅藻門主要是大型藻類。
一般將原生動物分為5綱:鞭毛綱(Mastigophora)、肉足綱(Sarcodina)、纖毛綱(Ciliatea)、孢子綱(Sporozoa)和吸管蟲綱(Suctoria)。
輪蟲隸屬輪形動物門Phylum Rotifera,輪蟲綱Rotifera。
枝角類隸屬于節(jié)肢動物門(Arthropoda),甲殼動物綱(Crustacea),鰓足亞綱。
橈足類隸屬于節(jié)肢動物門,甲殼綱,橈足亞綱。
(2)藻類培養(yǎng)和繁殖
一、藻種提純的思路方法
(1)分離篩選藻種的一般步驟是:樣品準備→富集培養(yǎng)→純種分離(篩選)→純種保存
二、藻種分離純化介紹(固體培養(yǎng)基分離和純化)
(1)方法1: 涂布平板法首先把微生物懸液作一系列的稀釋(如1:10、1:100、1:1000、1:10000),然后分別取不同稀釋液0.1毫升加到瓊脂平板涂布。
(2)方法2:平板劃線法 ?最簡單的分離藻種的方法是平板劃線法,即用接種環(huán)以無菌操作沾取少許待分離的材料,在無菌平板表面進行連續(xù)劃線,藻細胞數(shù)量將隨著劃線次數(shù)的增加而減少,并逐步分散開來,如果劃線適宜的話,藻細胞能一一分散,經(jīng)培養(yǎng)后,可在平板表面得到單藻落。有時這種單藻落并非都由單個細胞繁殖而來的,故必須反復分離多次才可得到純種。
樣品準備
鏡檢:細胞大小均勻、飽滿度高、色素體均勻,無原生動物、雜藻,細菌少。 ?處理方法:
1.控制液體總菌量<103cfu/ml(使用離心機處理)。
2.沒有離心機的可采用藻液:培養(yǎng)液(添加抗生素)=1:10稀釋后再劃培養(yǎng)皿。
富集培養(yǎng)
1.取1毫升樣品接種至含4毫升營養(yǎng)液的試管中培養(yǎng)(接種培養(yǎng)液占試管體積不超過1/3)。
2.培養(yǎng)時間:3-5天。
倒培養(yǎng)基
1、溫度:50-60℃左右,添加營養(yǎng)鹽。
2、左手拿培養(yǎng)皿,以中指、無名指和小指托住皿底,拇指和食指夾住皿蓋,靠近火焰,將皿蓋掀開,角度盡量小于45°。
3、邊緣不能有瓊脂。
4、體積:1/3-2/3
5、放置24h(培養(yǎng)皿表面不能有水珠等)
培養(yǎng)皿劃線(分離、保種)
注意事項:
1.平板表面不可
以有水膜或水滴。
2.挑取藻落時,
動作要輕,挑取量
不能過多。
–菌落多時: –菌落少時:
輕:不留痕跡
3.接種環(huán)的環(huán)要圓滑,環(huán)平面與培養(yǎng)基表面之間的夾角要小于45°,劃線時以腕力在培養(yǎng)基表面作輕快的滑動,勿使平板表面劃破嵌進培養(yǎng)基,線條間平行而且緊密,但是不要重疊。
4.挑取藻落要適中,不要太多也不要太少。藻落量一般為直徑1mm。
培養(yǎng)皿培養(yǎng)
1.光照:3000-5000lux
2.溫度:26-28℃
3.培養(yǎng)時間:3-5天
藻種篩選
篩選指標:
1.藻色:濃、亮、活
2.菌:菌落少
3.鏡檢:無原生動物、變異少
純種保種
1.純種保存1
低溫:10-12℃
光照:小于1000lux
時長:8-12h/d
保存時間:1個月
光照培養(yǎng)箱
2.純種保存2
低溫:4-5℃
光照:小于500lux
時長:1-2h/d
保存時間:3個月
冰箱
純種培養(yǎng)
一、平板鏡檢→試管培養(yǎng)(接種環(huán)挑取一個單藻落接種至5毫升培養(yǎng)液試管中)
二、5ml藻種→接種至50ml培養(yǎng)(按10%接種量接種)
三、. 50ml藻種→接種至200ml培養(yǎng)(按25%接種量接種)
四、 200ml藻種→接種至400ml培養(yǎng)(按50%接種量接種)
五、400ml藻種→接種至800ml培養(yǎng)(按50%接種量接種)
六、2000ml藻種→接種至4000ml培養(yǎng)(按50%接種)
圖片展示(涂布與劃線)
培養(yǎng)基配方
消毒與滅菌方法包括
1.物理方法(紫外、高壓蒸汽、干熱滅菌);
2.化學方法(環(huán)氧乙烷、次氯酸鈉、70-75%乙醇);
3.生物方法(青霉素-、氯霉素+和紅霉素-+);
滅菌在器具滅菌和培養(yǎng)基配制中的運用

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